Produkter

Effekter av tvättmedel på P-glykoproteinatpasaktivitet: skillnader i störningar av basala och verapamilberoende aktiviteter.

P-glykoprotein (P-gp), ett plasmamembranglykoprotein associerat med fenotypen multidrogresistens, är ansvarigt för det ATP-beroende utflödet av olika amfifila läkemedel.Med hjälp av membranvesiklar framställda från den multiläkemedelsresistenta cellinjen DC-3F/ADX, studerade vi störningen av basala (dvs. i frånvaro av läkemedel) och verapamilberoende P-gp ATPas-aktiviteter inducerade av olika detergenter, vid icke-solubilisering, såväl som vid solubilisering, koncentrationer.Den progressiva membransolubiliseringen med ökande detergentkoncentration övervakades genom ljusspridnings- och centrifugeringsexperiment.För icke-solubiliserande detergentkoncentrationer inducerade alla testade detergenter utom DOC en partiell hämning av P-gp ATPas-aktivitet, som inte var korrelerad med mängden av de olika testade detergenterna inkorporerade i membranen.Analys av den verapamil-inducerade P-gp-aktiveringen avslöjar att P-gp-ATPas-aktiviteten moduleras olika av de olika detergenterna vid icke-solubiliserande koncentrationer.Således är det mer sannolikt att specifika interaktioner mellan P-gp och detergenter inträffar snarare än en global membranstörning.Efter solubilisering av de olika testade detergenterna inhiberades den basala P-gp ATPas-aktiviteten praktiskt taget fullständigt, förutom i närvaro av CHAPS som kunde bevara denna aktivitet på en nivå som var jämförbar med den som uppmättes i naturliga membran.Den verapamil-inducerade P-gp ATPas-aktiveringen förlorades emellertid under P-gp-solubilisering av CHAPS, men återhämtade sig efter utspädning av CHAPS under dess kritiska micellära koncentration.Dessa observationer indikerar specifika interaktioner mellan P-gp- och CHAPS-molekyler inom de blandade micellerna.På det hela taget överensstämmer våra data som visar specifika interaktioner P-gp/detergenter med platsen för läkemedelstransportställena på P-gp-transmembrandomäner.