Produkter

Vaskulär hyperpermeabilitet bidrar till sjuklighet i inflammation.Nuvarande metoder för in vivo-bedömning av permeabilitet baserad på extravasation av Evans Blue (EB)-bundet albumin är besvärliga och saknar ofta känslighet.Vi utvecklade en ny infraröd fluorescens (IRF) metodik för mätning av EB-albumin extravasation för att kvantifiera vaskulär permeabilitet i murina modeller.Vaskulär permeabilitet inducerad av endotoxemi undersöktes för alla fasta organ, hjärna, hud och peritoneum med IRF och den traditionella absorbansbaserade mätningen av EB i vävnadsextrakt.Organ IRF ökade linjärt med ökande koncentrationer av intravenös EB (2,5-25 mg/kg).Vävnads-IRF var mer känslig för EB-ackumulering jämfört med den absorbansbaserade metoden.Följaktligen var skillnader i vaskulär permeabilitet och organ-EB-ackumulering mellan lipopolysackaridbehandlade och saltlösningsbehandlade möss ofta signifikanta när de analyserades med IRF-baserad detektion men inte genom absorbansbaserad detektion.EB upptäcktes i alla 353 organ som analyserats med IRF men endast i 67 % (239/353) av organ som analyserats med absorbansbaserad metodik, vilket visar förbättrad känslighet för EB-detektion i organ med IRF.Däremot mättes EB i plasma efter EB-administrering lätt med båda metoderna med hög korrelation mellan de två metoderna (n=116, r2=0,86).Kvantifiering av organspecifika EB-IRF-skillnader på grund av endotoxin var optimal när IRF jämfördes mellan möss matchade för vikt, kön och ålder, och med lämpliga korrigeringar för organvikt och EB-plasmakoncentrationer.Noterbart lämnar EB-IRF metodik organ intakta för efterföljande histopatologi.Sammanfattningsvis är EB-IRF en ny, mycket känslig, snabb och bekväm metod för relativ kvantifiering av EB i intakta behandlingsorgan jämfört med kontrollmöss.