Produkter

Vi utvecklade ett nytt litet störande RNA (siRNA) leveranssystem med användning av ett ternärt komplex med polyetylenimin (PEI) och y-polyglutaminsyra (y-PGA), som visade tystande effekt och ingen cytotoxicitet.De binära komplexen av siRNA med PEI var ungefär 73-102 nm i partikelstorlek och 45-52 mV i ζ-potential.Den tystande effekten av siRNA/PEI-komplex ökade med en ökning av PEI, och siRNA/PEI-komplex med ett laddningsförhållande större än 16 visade signifikant luciferas-knockdown i en kolonkarcinomcellinje från mus som regelbundet uttrycker luciferas (Colon26/Luc-celler).Men stark cytotoxicitet och blodagglutination observerades i siRNA/Lipofectamine-komplexet och siRNA/PEI16-komplexet.Omladdning av katjoniska komplex med en anjonisk förening rapporterades vara en lovande metod för att övervinna dessa toxiciteter.Vi förberedde därför ternära komplex av siRNA med PEI (laddningsförhållande 16) genom tillsats av y-PGA för att minska cytotoxicitet och leverera siRNA.Som förväntat minskade de ternära komplexens cytotoxicitet med en ökning av y-PGA-innehållet, vilket minskade komplexens ζ-potential.En stark tystande effekt jämförbar med siRNA/lipofektaminkomplex upptäcktes i ternära komplex inklusive y-PGA med en anjonisk ytladdning.Den höga inkorporeringen av ternära komplex i Colon26/Luc-celler bekräftades med fluorescensmikrokopi.Efter att ha uppnått nedbrytning av en exogent transfekterad gen, utvärderades komplexets förmåga att förmedla nedbrytning av en endogen hushållsgen, glyceraldehyd-3-fosfatdehydrogenas (GAPDH), i B16-F10-celler.Det ternära komplexet (siRNA/PEI16/y-PGA12-komplex) uppvisade en signifikant GAPDH-knockdown-effekt.Således utvecklade vi ett användbart siRNA leveranssystem.