Produkter

Indolamin 2,3-dioxygenas (IDO1) och tryptofan 2,3-dioxygenas (TDO) är två strukturellt olika enzymer som har olika vävnadsfördelning och fysiologiska roller, men båda katalyserar omvandlingen av tryptofan till N-formylkynurenin (NFK).IDO1 har kliniskt validerats som ett läkemedelsmål med små molekyler för cancer, medan prekliniska studier indikerar att TDO kan vara ett mål för cancerimmunterapi och neurodegenerativ sjukdom.Vi har utvecklat en screeninganalys med hög genomströmning för IDO1 och TDO baserad på en ny kemisk sond, NFK Green, som reagerar specifikt med NFK för att bilda en grön fluorescerande molekyl med en excitationsvåglängd på 400 nm och en emissionsvåglängd på 510 nm.Vi tillhandahåller den första jämförelsen sida vid sida av ett antal publicerade hämmare av IDO1 och TDO och avslöjar att den prekliniska IDO1-hämmaren förening 5l visar signifikant korsreaktivitet med TDO, medan den relativa selektiviteten för andra publicerade hämmare bekräftades.Lämpligheten för screening med hög genomströmning av analyserna visades genom screening av ett bibliotek med 87 000 kemiska substanser i 384- eller 1536-brunnars format.Slutligen visar vi att analysen också kan användas för att mäta kapaciteten hos celler att metabolisera tryptofan och för att mäta den cellulära styrkan hos IDO1- och TDO-hämmare.