Produkter

Kolsyraanhydrasaktivatorer: den första aktiveringsstudien av den humana sekretoriska isoformen VI med aminosyror och aminer.

Det sekretoriska isozymet av humant kolsyraanhydras (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, har klonats, uttryckts och renats i ett bakteriellt uttryckssystem.De kinetiska parametrarna för CO(2)-hydratiseringsreaktionen visade att hCA VI hade ak(cat) på 3,4 x 10(5)s(-1) och k(cat)/K(M) på 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (vid pH 7,5 och 20 grader C).hCA VI har en signifikant katalytisk aktivitet för den fysiologiska reaktionen, av samma storleksordning som den allestädes närvarande isoformen CA I eller det transmembrana, tumörassocierade isozymet CA IX.En serie aminosyror och aminer visades fungera som CA VI-aktivatorer, med varierande effektivitet.l-His, l-Trp och dopamin visade svaga CA VI-aktiverande effekter (K(A)s i intervallet 21-42 mikroM), medan d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonin och vissa pyridylalkylaminer var bättre aktivatorer, med K(A)s i intervallet 13-19 mikroM.De bästa CA VI-aktivatorerna var l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe och histamin, med K(A)s i intervallet 1,23-9,31 mikroM.Alla dessa aktivatorer förstärker k(cat), utan effekt på K(M), och deltar således i det hastighetsbestämmande steget i den katalytiska cykeln, protonöverföringsreaktionerna mellan enzymets aktiva plats och miljön.