Nyheter

Det finns många obesjungna hjältar runt omkring oss, som verkar vara vanliga, men i själva verket bidrar de tyst med mycket till oss.Proteinas K är den "okände hjälten" i den molekylära diagnostikindustrin, även om proteinas K är så lågmäld jämfört med de "stora och kraftfulla" i branschen att vi länge har förbisett dess betydelse.Med utbrottet av den nya kronepidemin har efterfrågan på proteinas K skjutit i höjden, och utbudet hemma och utomlands ligger långt efter konsumtionen, och alla insåg plötsligt att proteinas K är så viktigt.
Vad är användningen av proteinas K
Proteinas K är ett serinproteas med proteolytisk enzymaktivitet och kan upprätthålla aktivitet i ett brett spektrum av miljöer (pH (4-12,5), högsaltbuffert, hög temperatur på 70°C, etc.).Dessutom hämmas inte aktiviteten av proteinas K av SDS, urea, EDTA, guanidinhydroklorid, guanidinisotiocyanat, etc., och en viss mängd tvättmedel kan också öka aktiviteten av proteinas K. Vid medicinsk behandling (virus- och mikrobiell desinfektion ), mat (köttmörning), läder (mjukgörande av hår), vinframställning (alkoholklarering), aminosyraberedning (nedbrutna fjädrar), nukleinsyraextraktion, in situ hybridisering, etc., proteinas K Det finns applikationer.Den mest använda applikationen är nukleinsyraextraktion.
Proteinas K kan enzymolysera alla typer av proteiner i provet, inklusive de histoner som är hårt bundna till nukleinsyror, så att nukleinsyrorna kan frigöras från provet och frisättas i extraktet, vilket underlättar nästa steg av extraktion och rening.Vid detektering av viral nukleinsyra är proteinas K en av de viktiga komponenterna i virusprovtagningslösningen.Proteinas K kan knäcka och inaktivera pälsproteinet från viruset, vilket är säkrare under transport- och upptäcktsstadiet;dessutom kan proteinas K också bryta ned RNas förhindrar nedbrytningen av viralt RNA och underlättar nukleinsyradetektering.
Den över natten berömmelse av proteinas K
Oavsett om det är inom området vetenskaplig forskning eller inom IVD-området är nukleinsyraextraktion det mest grundläggande experimentet, så proteinas K har alltid varit en mycket viktig existens.Men tidigare var proteinas K mycket mindre välkänt än dess roll.En stor del av detta berodde på att utbud och efterfrågan förhållandet av proteinas K var mycket stabilt.Få människor skulle tro att tillgången på proteinas K skulle vara ett problem.
Med utbrottet av den nya kronepidemin har efterfrågan på nukleinsyratestning ökat.I slutet av juni 2020 har Kina slutfört nästan 90 miljoner nya krontester, och denna siffra är ännu mer alarmerande på en global skala.I nukleinsyraextraktionsexperiment är arbetskoncentrationen av proteinas K cirka 50-200 μg/mL.Generellt krävs det cirka 100 μg proteinas K för att extrahera ett prov av nukleinsyra.Vid faktisk användning, för att öka effektiviteten av nukleinsyraextraktion, kommer proteinas K ofta att användas i en ökad mängd.Nukleinsyradetektering av det nya coronaviruset har medfört en stor efterfrågan på proteinas K.Den ursprungliga balansen mellan utbud och efterfrågan för proteinas K bröts snabbt och proteinas K blev ett viktigt epidemiförebyggande material över en natt.
Svårigheter i produktionen av proteinas K
Även om med utvecklingen av epidemin, det viktiga värdet av proteinas K har värderats av människor, är det pinsamt att på grund av den överdrivna lågmälda proteinas K, har få inhemska företag varit involverade i produktionen av proteinas K. När människor vill etablera proteinas K-produktion Under produktionsprocessen upptäcktes att proteinas K är ett extremt speciellt protein.Det är extremt utmanande att utöka produktionskapaciteten för proteinas K på kort tid.
Den storskaliga produktionen av proteinas K står inför följande svårigheter
1. Lågt uttryck
Proteinas K kan icke-specifikt bryta ned de flesta proteiner och orsaka allvarlig toxicitet för expressionsvärdcellen.Därför är uttrycksnivån för proteinas K i allmänhet mycket låg.Screening av expressionssystem och stammar som i hög grad uttrycker proteinas K kräver i allmänhet en längre cykel.
2. Rester av pigment och nukleinsyror
Storskalig fermentering introducerar en stor mängd pigment- och värdnukleinsyrarester.Det är svårt att avlägsna dessa föroreningar med en enkel reningsprocess, och komplex rening ökar kostnaden och minskar återvinningshastigheten.
3. Instabilitet
Proteinas K är inte tillräckligt stabilt, det kan enzymolysera sig självt, och det är svårt att lagra det stabilt vid 37°C under lång tid utan ett skyddsmedel.
4. Lätt att fälla ut
Vid beredning av det frystorkade pulvret av proteinas K, för att säkerställa att fastämnet av proteinas K i det frystorkade pulvret är stort, är det nödvändigt att tillsätta ett frystorkat skyddsmedel i hög koncentration, men när koncentrationen av proteinas K når 20mg/ml och däröver är det lätt. Aggregeringen bildar en fällning, vilket medför stora svårigheter vid frystorkning av proteinas K med hög fast substans.
5. Stor investering
Proteinas K har stark proteasaktivitet och kan hydrolysera andra proteaser i laboratoriet.Därför kräver proteinas K specialiserade produktionsområden, utrustning och personal för forskning och utveckling och produktion.
XD BIOCHEMs proteinas K-lösning
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEMs tekniska lösningar inkluderar
Med användning av multi-kopia plasmidintegration väljs högexpressionsstammar med en expressionsnivå av 8g/L, vilket övervinner problemet med låg expressionsnivå av proteinas K;
Genom etableringen av en flerstegsreningsprocess avlägsnades värdcytokrom- och nukleinsyraresterna av proteinas K framgångsrikt under standardvärdet;
Genom screening med hög genomströmning av skyddande buffertformuleringar valdes en buffert som stabilt kan lagra proteinas K vid 37°C;
Screeningbuffertar övervinner problemet att proteinas K är lätt att aggregera och fälla ut i höga koncentrationer, och lägger grunden för proteinas K:s höga fasta halt frystorkning.

XD BIOCHEM proteinas K-prov

XD BIOCHEM proteinas K stabilitetstest: det kommer inte att ske någon signifikant förändring i aktivitet efter 80 dagar vid rumstemperatur

XD BIOCHEM proteinas K stabilitetstest: det kommer inte att ske någon signifikant förändring i aktivitet efter 80 dagar vid rumstemperatur

Jämförelse av nukleinsyraextraktionseffekten av XD BIOCHEM proteinas K och konkurrerande produkter.I processen för nukleinsyraextraktion används XD BIOCHEM respektive kompetitivt proteinas K.Extraktionseffektiviteten för XD BIOCHEM proteinas K är högre och Ct-värdet för målgenen är lägre.