Produkter

PIPES [piperazin-N,N'-bis(2-etansulfonsyra)] används ofta som buffertmedel inom biokemin.Det är en etansulfonsyrabuffert utvecklad av Good et al.på 1960-talet.PIPES har ett pKa nära det fysiologiska pH som gör det användbart i cellodlingsarbete.Det har dokumenterats att minimera lipidförlusten vid buffring av glutaraldehydhistologi i växt- och djurvävnader. Ett buffrande medel med ett pKa nära fysiologiskt pH.

Antimikrobiell peptid magainin 2 bildar porer i lipidmembran och inducerar membranpermeation av cellinnehållet.Även om denna genomträngning sannolikt är den främsta orsaken till dess bakteriedödande aktivitet, är mekanismen för porbildning fortfarande dåligt förstådd.Vi undersökte därför i detalj interaktionen mellan magainin 2 och lipidmembran med hjälp av enkla gigantiska unilamellära vesiklar (GUV).Bindningen av magainin 2 till lipidmembranet hos GUV ökade fraktionsförändringen i arean av membranet, δ, som var proportionell mot ytkoncentrationen av magainin 2, X. Detta indikerar att hastighetskonstanten för magainin 2 inducerade två -tillståndsövergången från det intakta tillståndet till portillståndet ökade kraftigt med en ökning av δ.Spänningen av ett lipidmembran efter aspiration av en GUV aktiverade också magainin 2-inducerad porbildning.För att avslöja platsen för magainin 2 undersöktes interaktionen av karboxifluorescein (CF)-märkt magainin 2 (CF-magainin 2) med enstaka GUVs innehållande en vattenlöslig fluorescerande sond, AF647, med konfokalmikroskopi.I frånvaro av spänning på grund av aspiration, efter interaktionen av magainin 2, ökade fluorescensintensiteten hos GUV-kanten på grund av CF-magainin 2 snabbt till ett konstant värde, som förblev konstant under lång tid, och vid 4-32 s före i början av läckaget av AF647 började fälgintensiteten öka snabbt till ett annat stabilt värde.Däremot, i närvaro av spänningen, observerades ingen ökning i fälgintensitet precis innan läckaget började.Dessa resultat indikerar att magainin 2 inte kan translokera från det yttre till det inre monoskiktet förrän strax före porbildning.Baserat på dessa resultat drar vi slutsatsen att en magainin 2-inducerad por är en sträckaktiverad por och sträckningen av det inre monoskiktet är en huvudsaklig drivkraft för porbildningen.