Produkter

Över 70 % av låggradiga gliom bär på en heterozygot R132H-mutation i genen som kodar för isocitratdehydrogenas 1 (IDH1).Detta ger enzymet den nya förmågan att omvandla a-ketoglutarat till 2-hydroxiglutarat, vilket i slutändan leder till tumörbildning.Den huvudsakliga källan till produktion av 2-hydroxyglutarat är glutamin, som vid cancer också är en källa för anapleros i trikarboxylsyracykeln (TCA).En alternativ källa till anapleros är pyruvatflöde via pyruvatkarboxylas (PC), som är en vanlig väg i normala astrocyter.Målet med denna studie var att fastställa om PC fungerar som en källa till TCA-anapleros i IDH1-mutantceller där glutamin används för 2-hydroxyglutaratproduktion. Immortaliserade normala mänskliga astrocyter konstruerade för att uttrycka heterozygot mutant IDH1 eller vildtyp IDH1 undersöktes.Flux av pyruvat via PC och via pyruvatdehydrogenas (PDH) bestämdes genom att använda magnetisk resonansspektroskopi för att undersöka märkningen av [2-¹³C]glukoshärledd ¹³C-märkt glutamat och glutamin.Aktivitetsanalyser, RT-PCR och western blotting användes för att undersöka uttrycket och aktiviteten av relevanta enzymer.Cancer Genome Atlas (TCGA)-data analyserades för att bedöma uttrycket av enzymer i humana gliomprover. Jämfört med vildtypsceller ökade mutanta IDH1-celler signifikant fraktionerat flöde genom PC.Detta var associerat med en signifikant ökning av PC-aktivitet och uttryck.Samtidigt minskade PDH-aktiviteten signifikant, sannolikt förmedlad av signifikant ökad hämmande PDH-fosforylering av PDH-kinas 3. I enlighet med observationerna i celler indikerade analys av TCGA-data en signifikant ökning av PC-uttryck i mutant IDH-uttryckande humana gliomprover jämfört med vild- typ IDH. Våra fynd tyder på att förändringar i PC och PDH kan vara en viktig del av cellulär anpassning till IDH1-mutationen och kan fungera som potentiella terapeutiska mål.