Produkter

CTP:fosfokolin cytidylyltransferas α (CCTα) är ett nukleärt enzym som katalyserar det hastighetsbegränsande steget i CDP-kolin-vägen för fosfatidylkolin (PC) syntes.Lipidaktivering av CCTα resulterar i dess translokation till kärnhöljet och expansion av ett intranukleärt membrannätverk som kallas nukleoplasmatiskt reticulum (NR) av en mekanism som involverar membrandeformation.Nukleära laminer krävs också för stabilitet och spridning av NR, men om denna unika struktur, eller kärnlamina i allmänhet, krävs för PC-syntes är inte känt.För att undersöka detta förhållande utarmades den nukleära lamina av RNAi eller stördes av uttryck av Hutchinson-Gilford progeria syndrom (HGPS) mutant lamin A (progerin), och effekten på CCTα och kolin metabolism analyserades.siRNA-medierad tystnad av lamin A/C eller lamin B1 i CHO-celler för att minska NR hade ingen effekt på PC-syntes, medan dubbel knockdown ospecifikt hämmade vägen.För att bekräfta hans mindre roll i PC-syntes, upptäcktes endast 10% av övergående överuttryckt kolin/etanolamin-fosfotransferas i NR.I CHO-celler var CCTa nukleoplasmatisk och samlokaliserad med GFP-progerin i nukleära veck och invaginationer;HGPS-fibroblaster visade emellertid en onormal fördelning av CCTa i cytoplasman och kärnhöljet som åtföljdes av en 2-faldig minskning av PC-syntesen.Trots sin ändrade lokalisering visade kolinmärkningsexperiment att CCT-aktiviteten var opåverkad, och hämning av PC-syntes spårades till minskad aktivitet hos en hemikoliniumkänslig kolintransportör.Vi drar slutsatsen att CCTα och laminer specifikt samarbetar för att bilda NR, men den övergripande strukturen av kärnhöljet har en minimal inverkan på CCT-aktivitet och PC-syntes.