Produkter

1. Metabolitprofileringsmetoder är viktiga verktyg för mätning av metabolitpooler i biologiska system.Medan de flesta metabolitprofileringsmetoder rapporterar relativa intensiteter eller är beroende av ett fåtal interna standarder som representerar alla metaboliter, är det ultimata kravet på en kvantitativ beskrivning av metabolitpoolen i biologiska celler och vätskor absolut koncentrationsbestämning.Vi rapporterar här en hög genomströmning och känslig gaskromatografi/tandem masspektrometri (GC/MS/MS) riktad metabolitprofileringsmetod som möjliggör absolut kvantifiering av alla detekterade metaboliter.Metoden är baserad på metylklorformiatderivatisering och kvantifiering genom att spika prover med metabolitstandarder separat derivatiserade med deutererade derivatiseringsreagenser.Den traditionella elektronstötjoniseringen ersätts med positiv kemisk jonisering eftersom den senare i mycket större utsträckning bevarar molekyljonen och andra högmolekylära fragment.Detta gjorde det lättare att välja unika MS/MS-övergångar bland de många sameluerande metaboliterna.För närvarande omfattar den nya GC/MS/MS-metoden 67 vanliga primära metaboliter av vilka de flesta tillhör grupperna amino- och icke-aminoorganiska syror.Vi visar metodens tillämpbarhet på urin- och serumprover.Metoden är en betydande förbättring av nuvarande metodik för kvantitativ GC/MS-metabolitprofilering av aminosyror och icke-aminoorganiska syror.

2.24S-hydroxikolesterol (24OHC) och 27-hydroxikolesterol (27OHC) är två strukturellt lika oxysteroler av olika ursprung - den förra bildas nästan uteslutande i hjärnan och den senare bildas i mindre utsträckning i hjärnan än i de flesta andra organ.HYPOTES SOM SKALL TESTAS: Neuronal skada och/eller demyelinisering orsakar ökat flöde av 24OHC från hjärnan till cerebrospinalvätskan (CSF), medan en defekt blod-hjärnbarriär orsakar ökat flöde av 27OHC från cirkulationen in i CSF. Isotoputspädningsmassa spektrometri användes för att analysera de två oxysterolerna i CSF och plasma från mer än 250 patienter med olika neurologiska och geriatriska sjukdomar. CSF-nivåerna av de två oxysterolerna påverkades mycket mer av de olika sjukdomarna än plasmanivåerna.Patienter med aktiva demyeliniserande sjukdomar hade ökade nivåer av 24OHC i CSF med ett relativt högt 24OHC/27OHC-förhållande.Patienter med meningit hade generellt höga nivåer av båda steroiderna med ett lågt 24OHC/27OHC-förhållande.Patienter med Alzheimers sjukdom hade något ökade nivåer av 24OHC i CSF med mindre ökning av 27OHC.Patienter med multipel skleros hade en tendens att ha högre nivåer av 24OHC under aktiva perioder med ett högt 24OHC/27OHC-förhållande. Mätningar av de två oxysterolerna i CSF och plasma kan avsevärt lägga till befintliga biokemiska metoder för utvärdering av neurologiska sjukdomar.