Produkter

Den föreliggande studien beskriver en enkel och effektiv metod som använder högpresterande vätskekromatografi (HPLC) kopplad till fluorescensdetektion för bestämning av kinetiska parametrar för glutamatupptag i nervvävnad.Näthinnevävnad erhållen från 7 dagar gamla kycklingar inkuberades med kända koncentrationer av glutamat (50-2000 μM) i 10 minuter, och nivåerna av den o-ftaldehyd (OPA)-derivatiserade neurotransmittorn i inkubationsmediet mättes.Genom att bedöma skillnaden mellan initiala och slutliga koncentrationer av glutamat i mediet karakteriserades en mättbar upptagningsmekanism (K(m)=8,2 och V(max)=9,8 nmol/mg protein/min).Denna åtgärd var till stor del natrium- och temperaturberoende, vilket starkt stöder att mekanismen för koncentrationsminskningar verkligen är upptag av transportörer med hög affinitet.Utöver detta visade våra resultat också att zinkklorid (en hämmare av glutamat/aspartattransportörer) framkallade en koncentrationsberoende minskning av glutamatupptaget, vilket visar specificiteten hos vår metodik.Sammantaget karaktäriserar föreliggande arbete en alternativ metod för att utvärdera glutamatupptag i nervvävnad med hjälp av HPLC.Detta tillvägagångssätt kan vara ett viktigt verktyg för studier associerade med karakterisering av små förändringar i glutamattransport relaterade till skador på centrala nervsystemet.